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可能影響酶免疫測定ELISA結(jié)果的標本內(nèi)源性干擾因素1.類風濕因子（rheumatoidfactors,RF）在類風濕患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有較高或不同濃度的RF，RF一般為TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變性IgG...

標準品的制備、鑒定、計量1．標準品的制備：標準品的制備是非常復雜的問題，也是標記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實驗室標準品（或商品化試劑中標準品）的制備。1）基質(zhì)的制備：如前所述，作為標準品的介質(zhì)（基質(zhì)）成分應與被測樣品相同...

ELISA技術(shù)中的抗原抗體反應抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重...

ELISA技術(shù)與自動化在一般的概念里，ELISA技術(shù)的可操作性強，不需復雜設(shè)備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果，便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對質(zhì)量控制意識的加強，盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動強度等觀念的不斷改進，...

ELISA操作要點1.標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預處理（如糞便和某些...

蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印法檢定蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)經(jīng)SDS-PAGE后，膠片浸入轉(zhuǎn)印緩沖液，蛋白質(zhì)可被轉(zhuǎn)印到硝化纖維紙（nitrocellulose）上，先經(jīng)?素洗去SDS，并使蛋白質(zhì)回?原態(tài)抗原性，可使用抗體進?免疫染色（Towbinetal,1979）。儀器...

蛋白質(zhì)提取與純化技術(shù)選擇材料及預處理以蛋白質(zhì)和結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ)，從分子水平上認識生命現(xiàn)象，已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學發(fā)展的主要方向，研究蛋白質(zhì)，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質(zhì)。蛋白質(zhì)的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理...

酶聯(lián)免疫技術(shù)的特點酶聯(lián)免疫技術(shù)是利用酶催化底物反應的生物放大作用，提高特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種標記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)...

1.雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2）加受檢標本，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他...

免疫熒光技術(shù)操作步驟一.直接免疫熒光法測抗原基本原理將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4...